von kossa染色试剂盒

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品    牌:
HaoKebio
货    号:
HX20018
规    格:
数    量:
货号 名称 规格
HX20018 von kossa染色试剂盒 20mL*3
钙在人体内大量存在,构成骨骼作为支持人体的支架,在分泌、运送、肌肉收缩、神经传导等也起重要作用。钙在机体内以两种形式存在,一种是离子钙,存在血液循环内,即所谓血钙;另一种是结合钙,和蛋白、碳酸或磷酸结合而沉着在组织内。钙盐染色常用方法有硝酸银法和茜素红S法,钙盐染色液(Von Kossa银法)又称冯库萨染色液,属金属置换法,其原理在于Von Kossa银溶液作用于含有不溶性钙盐的切片时,钙被银置换,银盐在光的作用下被还原为黑色金属银,适用于大量样本的钙盐组织染色。染色结果:钙盐黑褐色至深黑色,细胞核根据复染液不同而不同。
产品名称 von kossa染色试剂盒
产品编号 HX20018
曾用货号 HK2039
运输与储存 4℃运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法 一、常规染色:1、组织固定于10%中性福尔马林固定液,常规脱水包埋。2、切片厚度3~5um,常规二甲苯脱蜡至水,蒸馏水洗。3、切片入Von Kossa银溶液,强光照射15~60min,蒸馏水洗1min。4、入海波溶液处理2min,HE染色液或Van Gieson复染细胞核1min。5、常规脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。二、不溶性钙染色:1、组织固定于10%中性福尔马林固定液,常规脱水,注意在95%乙醇中脱水应充分。2、塑料包埋,室温过夜,37℃烤箱中聚合2~4天,-20℃冰箱冷却15~20min。3、切片厚度3~5um,未脱钙骨切片脱塑至水,蒸馏水洗。4、切片入Von Kossa银溶液,强光照射10~60min,蒸馏水洗。5、入海波溶液处理2min,HE染色液、中性红或Van Gieson复染细胞核1min。6、常规脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。阴性对照:取另外一张连续切片脱蜡(脱塑)至水,置于Von Kossa对照液处理10~20min,蒸馏水冲洗,与试验片一同入Von Kossa银溶液,余下步骤同上,结果为阴性。
注意事项 1.钙盐组织固定以中性福尔马林为佳,不宜采用Bouin液等酸性固定液和甲醛钙固定液;如用常规的10%福尔马林固定,固定4~6h后即可进行脱水包埋,以防止固定液酸化导致钙盐溶解。2.作用时间取决于阳光照射时光的强度和时间;如暴露于强光下15min已经足够;如暴露于紫外灯下10min即可;如暴露于一般光线下,宜适当延长曝光时间。3.如果钙盐染色过深,可用蒸馏水适当稀释Von Kossa银溶液或减少光照时间或光照强度;如果钙盐染色较浅,应增加Von Kossa银溶液用量并增加光照时间和光照强度。4.该染色法可以区分尿酸盐和钙盐,其原理在于钙盐不溶解于碳酸锂溶液,尿酸盐易溶解于碳酸锂溶液,切片经碳酸锂处理后入Von Kossa银溶液并置于强光下尿酸盐呈阴性反应。5.操作时请穿实验服,并佩戴一次性手套。

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