| 货号 |
名称 |
规格 |
| HIW0001S |
RIPA 总蛋白裂解液(强) |
100ml
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RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一种传统的细胞及组织快速裂解液。RIPA裂解液有很多配方,按其裂解效果主要分为强,中,弱三种。RIPA(强)裂解液组织、细胞得到的蛋白样品可以用于常规的PAGE、Western等对蛋白活性没有严格要求的实验,本产品主要成分包含50mM Tris-HCl(pH=7.4),150 mM NaCl,1 mM EDTA-2Na,1%NP-40,1 mM EGTA,0.5%脱氧胆酸钠及0.1% SDS。
本产品适用于动物或植物组织及细胞样品,也可用于真菌或细菌样品。
| 产品名称 |
RIPA 总蛋白裂解液(强) |
| 产品编号 |
HIW0001S |
| 曾用货号 |
HKW2011A |
| 运输与储存 |
冰袋(wet ice)运输,4℃避光保存,有效期18个月。 |
| 使用方法 |
1.自备蛋白酶抑制剂。RIPA裂解液(中)在临用前需加入蛋白酶抑制剂,防止蛋白降解。推荐和Haokebio的抑制剂系列搭配使用。
以下使用方法中提到的RIPA裂解液(中)均指已添加蛋白酶抑制剂。
对于组织样品:
2.组织块用预冷PBS洗涤,去除血污,剪成细小碎块置于匀浆器中。
加入10倍组织体积RIPA裂解液(中)低温匀浆。注意,RIPA裂解液(中)的使用量可按照约每50mg组织与1mL裂解液的比例添加。如组织蛋白含量较低,
可降低裂解液的用量,以提高粗提溶液中的蛋白浓度。
3.将匀浆液转移至1.5mL离心管中,振荡。冰浴30min,期间每10min用移液器反复吹打,确保组织细胞完全裂解;
4.12000g 离心5min,收集上清,即为总蛋白溶液。
对于贴壁细胞样品:
1.用PBS清洗细胞2-3次,最后一次彻底吸干残留液。
2.按照6孔板每孔细胞250μL裂解液的比例吸取RIPA裂解液(中)于细胞培养板、瓶内,反复晃动培养板、瓶,使裂解液与细胞充分接触3-5min。
3.用细胞刮刀将细胞刮下,收集到离心管中。
4.12000g离心5min,收集上清,即为总蛋白溶液。
对于悬浮细胞样品:
1.离心收集细胞。
2.按照6孔板每孔250μL裂解液的比例将细胞液与RIPA裂解液(中)混合,振荡。
3.冰浴30min,期间每10min用移液器反复吹打数次,确保细胞完全裂解。
4.12000g离心5min,收集上清,即为总蛋白溶液。 |
| 注意事项 |
1. 组织或血细胞裂解时若会出现粘稠状。可用移液器反复吹打或振荡器振荡,直至呈液状为止。
2. 本试剂不含有蛋白酶抑制剂,需自备蛋白酶抑制剂并在临用前加入。
3. 操作时请穿实验服,佩戴一次性手套。 |