| 货号 |
名称 |
规格 |
| HIM0052 |
一步法tunel检查试剂盒（红，AF555) |
50T
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细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测，可以发现180-200bp的DNAladder。基因组DNA断裂时，暴露的3'-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(TerminalDeoxynucleotidyl Transferase,TdT)的催化下加上红色AF555标记的dUTP，从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测，这就是TUNEL(TdT-mediated dUTPNick-End Labeling)法检测细胞凋亡的原理
| 产品名称 |
一步法tunel检查试剂盒（红，AF555) |
| 产品编号 |
HIM0052 |
| 曾用货号 |
HKI0011 |
| 使用方法 |
石蜡切片荧光tunel实验步骤
石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ15min-二甲苯Ⅱ15min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min，取出置于通风厨内等酒精晾干后放入自来水中稍洗，蒸馏水洗。(冬天应提高脱蜡温度或适当延长脱蜡时间）
通透：pH6.0柠檬酸修复液中火修复8min ，室温冷却，用免疫组化笔划圈，之后纯水洗三次(重要)。（通透方式有多钟：1蛋白酶消化，2tritonx100通透剂通透，柠檬酸修复）
配试剂工作液以及孵育：荧光反应液和TdT酶按50:1比例混合，此液为tunel工作液，，将tunel工作液加入到圈内覆盖组织，切片平放于湿盒内，37℃恒温箱孵育1到2小时，湿盒内加少量水保持湿度。
DAPI复染细胞核：切片用PBS（PH7.4）洗涤3次，每次5min。去除PBS后在圈内滴加DAPI染液，避光室温孵育10min。
封片：玻片置于PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。切片稍甩干后用抗荧光淬灭封片剂封片。
镜检拍照：切片于尼康倒置荧光显微镜下观察并采集图像。
石蜡切片荧光tunel结果判读
DAPI染出来的细胞核在紫外的激发下为蓝色，试剂盒为AF555标记，阳性凋亡细胞核为红色。 |
| 注意事项 |
1. 本试剂仅供科研。
2. 操作时请穿实验服，佩戴一次性手套。 |
