| 货号 |
名称 |
规格 |
| HIM0051 |
一步法tunel检查试剂盒（绿，AF488) |
50T
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细胞在发生凋亡时，会激活一些 DNA 内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组 DNA。
细胞凋亡时抽提 DNA 进行电泳检测，可以发现 180-200bp 的 DNAladder。基因组 DNA 断裂时，
暴露的 3'-OH 可以在末端脱氧核苷酸转移酶(TerminalDeoxynucleotidyl Transferase,TdT)
的催化下加上绿色 AF488 标记的 dUTP，从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测，这就是 TUNEL(TdT-mediated dUTPNick-End Labeling)法检测细胞凋亡的原理。
| 产品名称 |
一步法tunel检查试剂盒（绿，AF488) |
| 产品编号 |
HIM0051 |
| 曾用货号 |
HKI0010 |
| 使用方法 |
石蜡切片荧光 tunel 实验步骤
石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ15min-二甲苯Ⅱ15min-无水乙醇Ⅰ5min-无水
乙醇Ⅱ5min，取出置于通风厨内等酒精晾干后放入自来水中稍洗，蒸馏水洗。(冬天应提高脱蜡
温度或适当延长脱蜡时间）
通透：PH6.0 柠檬酸修复液中火修复 8min ，室温冷却，用免疫组化笔划圈，之后纯水洗三
次(重要)。（通透方式有多种：1 蛋白酶消化，2tritonx100 通透剂通透，柠檬酸修复）
配试剂工作液以及孵育：荧光反应液（白光 tunel 反应液）和 TdT 酶按 50:1 比例混合，此 液为 tunel 工作液，，将 tunel 工作液加入到圈内覆盖组织，切片平放于湿盒内，37℃恒温箱 孵育 30min 到 2 小时（具体需要预实验），湿盒内加少量水保持湿度。
DAPI 复染细胞核：切片用 PBS（PH7.4）洗涤 3 次，每次 5min。去除 PBS 后在圈内滴加 DAPI染液，避光室温孵育 10min。
封片：玻片置于 PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤 3 次，每次 5min。切片稍甩干后用抗荧光淬灭封片剂封片。
镜检拍照：切片于尼康倒置荧光显微镜下观察并采集图像。
镜检拍照：切片于尼康倒置荧光显微镜下观察并采集图像。（紫外激发波长 330-380nm，
石蜡切片荧光 tunel 结果判读
DAPI 染出来的细胞核在紫外的激发下为蓝色，试剂盒为 AF488 标记，阳性凋亡细胞核为绿色。 |
| 注意事项 |
1. 本试剂仅供科研。
2. 操作时请穿实验服，佩戴一次性手套。 |
