| 货号 |
名称 |
规格 |
| HIM0015 |
DAB缓冲液 |
10ml
|
DAB是过氧化物酶（POD）的显色底物，DAB显色液主要用于免疫过氧化物酶法，适用于辣根过氧化物酶HRP标记的免疫印记或免疫组化反应。过氧化物酶催化底物发生反应，于反应部位产生棕色沉淀物，免疫印记可直接在膜上显示条带；免疫组化标本显色时间一般为室温 5-20 分钟，随后在显微镜下观察显色情况，显色充分后应将标本及时脱水封固，其终产物可直接在光镜下观察，也可经OsO4处理后，增加反应产物的电子密度，用于电镜观察。
本DAB缓冲液可保护过氧化氢及延缓DAB氧化作用，色原与底物缓冲液混合后，可延长保存。
| 产品名称 |
DAB缓冲液 |
| 产品编号 |
HIM0015 |
| 曾用货号 |
HKI0040 |
| 使用方法 |
常规脱蜡水化： 石蜡切片经常规脱蜡和水化。
抗原热修复： 参照一抗说明书进行抗原修复。
DAB 工作液的配制：
按每毫升DAB缓冲液中加入50μLDAB色原（约 1滴）的比例配制DAB工作液，DAB工作液应现配现用。配制好的DAB工作液需在2小时内使用，如出现沉淀，使用前先混匀。
操作步骤：
1）抗原修复完毕后自然冷却的切片，用自来水清洗。
2）除去切片上组织周围的液体，用免疫组化笔圈定玻片上的待测组织区域并放入PBST缓冲液中。
3）取出切片，除去PBST缓冲液，滴加内源性过氧化物酶阻断剂（视切片大小以完全覆盖切片组织为宜），于组织上孵育10分钟，用PBST清洗切片。
4）除去PBST缓冲液，滴加100μL左右一抗工作液（视切片大小以完全覆盖切片组织为宜），于组织上进行孵育（按照各自一抗说明书操作）。一抗孵育完毕，用PBST清洗切片。
5）除去PBST缓冲液，每张切片加酶标羊抗鼠/兔IgG聚合物（试剂B）100μL左右（视切片大小以完全覆盖切片组织为宜），室温下孵育30分钟。PBST缓冲液清洗切片。
6）用预备好的DAB工作液进行显色，每张切片加100μL左右DAB工作液（视切片大小以完全覆盖切片组织为宜），显色时间为1-5分钟（镜检控制染色），用自来水冲洗终止显色反应。
7）需要时，使用苏木素染液复染。
8）切片经过脱水，透明，封片。
注：若将本试剂应用于自动检测平台，需根据实际情况确认使用条件。 |
| 注意事项 |
常规脱蜡水化： 石蜡切片经常规脱蜡和水化。
抗原热修复： 参照一抗说明书进行抗原修复。
DAB 工作液的配制：
按每毫升DAB缓冲液中加入50μLDAB色原（约 1滴）的比例配制DAB工作液，DAB工作液应现配现用。配制好的DAB工作液需在2小时内使用，如出现沉淀，使用前先混匀。
操作步骤：
1）抗原修复完毕后自然冷却的切片，用自来水清洗。
2）除去切片上组织周围的液体，用免疫组化笔圈定玻片上的待测组织区域并放入PBST缓冲液中。
3）取出切片，除去PBST缓冲液，滴加内源性过氧化物酶阻断剂（视切片大小以完全覆盖切片组织为宜），于组织上孵育10分钟，用PBST清洗切片。
4）除去PBST缓冲液，滴加100μL左右一抗工作液（视切片大小以完全覆盖切片组织为宜），于组织上进行孵育（按照各自一抗说明书操作）。一抗孵育完毕，用PBST清洗切片。
5）除去PBST缓冲液，每张切片加酶标羊抗鼠/兔IgG聚合物（试剂B）100μL左右（视切片大小以完全覆盖切片组织为宜），室温下孵育30分钟。PBST缓冲液清洗切片。
6）用预备好的DAB工作液进行显色，每张切片加100μL左右DAB工作液（视切片大小以完全覆盖切片组织为宜），显色时间为1-5分钟（镜检控制染色），用自来水冲洗终止显色反应。
7）需要时，使用苏木素染液复染。
8）切片经过脱水，透明，封片。
注：若将本试剂应用于自动检测平台，需根据实际情况确认使用条件。 |
